黄贞杰;陈玲;张积森;叶冰莹;陈由强;陈如凯;

• 1:福建师范大学生命科学学院
• 2:农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室
• 3:福建省发育与神经生物学重点实验室

摘要(Abstract)：

利用PCR技术,以酿酒酵母S288c的基因组DNA为模板,扩增酿酒酵母肌醇-1-磷酸合成酶基因(ScINO1)包含1 602bp的开放读码框,克隆后经PCR和酶切反应进行了鉴定,测序结果与GenBank上已登录的ScINO1序列完全一致.对PUG6载体进行改造,构建了rDNA介导的多拷贝整合表达载体pURH,并将ScINO1基因连入载体pURH,获得ScINO1基因超表达载体pURIH.为下一步的微生物发酵法产肌醇和获得能够耐高乙醇的酵母工程菌株的研究奠定基础.

关键词(KeyWords)： ScINO1基因;多拷贝整合;载体构建;酿酒酵母

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(CARS-20-4-4)

作者(Authors): 黄贞杰;陈玲;张积森;叶冰莹;陈由强;陈如凯;

参考文献(References)：

• [1]郭育涛,陈坚,伦世仪.微生物发酵法生产肌醇的研究[J].西北轻工业学院学报,1998,16(1):116-119.
• [2]张厚程,池振明.INO1基因在粟酒裂殖酵母中的表达及对蔗糖酶分泌和磷脂合成的影响[J].山东大学学报:理学版,2002,37(6):544-547.
• [3]任云娥,李好管.肌醇的应用、市场及技术进展[J].化工科技市场,2001,10:11-13.
• [4]Chi Z,Liu Z.Inositol-mediated invertase secretion in Saccharomyces sp.W4[J].Enzyme and Microbial Techno-logy,1997,21(6):463-467.
• [5]Furukawa K,Obata H,Kitano H,et al.Effect of cellular inositol content on ethanol tolerance of Saccharomycescerevisiae in sake brewing[J].Journal of Bioscience and Bioengineering,2004,98(2):107-113.
• [6]Hong M E,Lee K S,Yu B J,et al.Identification of gene targets eliciting improved alcohol tolerance inSaccharomyces cerevisiae through inverse metabolic engineering[J].Journal of Biotechnology,2010,149(1/2):52-59.
• [7]张明生,吴耕,钟晓力,等.酵母表达体系及其在抗体工程中的应用[J].生物工程进展,2001,21(1):15-18.
• [8]刘向勇,沈煜,郭亭,等.rDNA介导的多拷贝整合表达载体的构建及其在酿酒酵母工业菌株中的应用[J].山东大学学报:理学版,2005,40(3):105-109.
• [9]Delneri D,Tomlin G C,Wixon J L,et al.Exploring redundancy in the yeast genome:an improved strategy for useof thecre-loxP system[J].Gene,2000,252(1/2):127-135.