福建师范大学学报(自然科学版)

2007, (02) 71-74

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pVT102U/α-bgln重组真核表达质粒的构建和鉴定
Construction and Identification of the Recombinant Eukaryotic Expression Plasmid pVT102U/α-bgln

林志楷;叶冰莹;潘海芳;陈由强;陈如凯;

摘要(Abstract):

构建重组真核表达质粒pVT102U/α-bgln使之可以在酿酒酵母中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以含有从黑曲霉中获得的编码β-葡萄糖苷酶(bgln)成熟肽的cDNA的克隆质粒pMD19T-bgln为模板,用PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln),利用真核表达载体pVT102U/α构建pVT102U/α-bgln重组质粒,PCR结果显示扩增片段约2.6 kb,与预期相同.用酶切电泳验证重组结果的正确性,重组质粒酶切后显示其大小约10 kb,大小及酶切图谱与预期相同.测序检测质粒重组后序列情况,经测序发现插入片段两端序列无改变,且读码框正确.pVT102U/α-bgln质粒构建成功.

关键词(KeyWords): β-葡萄糖苷酶;pVT102U/α;构建;真核表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(30371177);; 福建省科技厅重点项目(2005N037);; 卫生部基金资助项目(JA05225/wkj2);; 福建省自然科学基金资助项目(B0310004)

作者(Authors): 林志楷;叶冰莹;潘海芳;陈由强;陈如凯;

参考文献(References):

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